抗体工程技术（抗体工程包括哪些方面的内容）

抗体工程是指利用重组DNA和蛋白质工程技术，对抗体基因进行加工改造和重新装配，转染适当的受体细胞后，表达抗体分子，或用细胞融合、化学修饰等方法改造抗体分子的技术。

健康是每一个人绕不开的问题，如何让全家人身心健康的幸福的生活，是每一个父母应尽的家庭责任，父母照顾着全家人的健康，特别是孩子的身心健康，左养右学教育赖颂强讲孩子心理建设时，再三强调孩子身心健康的重要性。

经抗体工程改造的抗体分子是按人类设计重新组装的新型抗体分子，可保留（或增加）天然抗体的特异性和主要生物学活性，去除（减少或替代）无关结构，在药物研发领域具有巨大的应用前景。

初筛获得单克隆抗体后，以抗体工程改造是抗体药物研发的必经之路。基于多年蛋白表达、基因工程抗体平台利用其技术优势可以对外提供涵盖嵌合抗体构建、抗体片段生产、抗体人源化、抗体亲和力成熟在内的抗体基因工程改造和生产的一站式服务，为您多种改造尝试及更好的研究抗体特性提供重要支持。

抗体工程技术（抗体工程包括哪些方面的内容）

一．抗体亲和力成熟：

目前，药用抗体的研发主要基于杂交瘤细胞或者体外抗体库。实际研发过程中，经过了常规筛选所得的抗体，多诸多方面需要更细致的改进，包括亲和力、免疫原性、半衰期等等，抗体领域这些年来做了很多相关的研究和实践。

抗体亲和力成熟是研究的重要方向之一。理论上，抗体亲和力的提高有助于改善抗体的特异性和效力，有助于减少用药剂量，降低毒副作用等。发展抗体亲和力成熟的技术，不仅有助于抗体药物的研发和质量改善，同时也有助于人们更好的理解抗体与靶点相互作用的机理，更好地认识靶点功能。

技术原理：

1.模拟体细胞高频突变的抗体亲和力成熟策略：

BCR基因重排后的成熟B细胞受到抗原刺激后，会于生发中心发生重链和轻链V区的高频率突变(主要是点突变) ,之后再经过FDC捕获抗原使表达高亲和力BCR的B细胞免于凋亡。这一过程使得后代B细胞的BCR对抗原的平均亲和力得到提升。这样的体细胞高频突变属于二次免疫应答，帮助可有效识别抗原的抗体进一步成熟，有助于机体有效抵抗外来抗原的再次入侵。

抗体亲和力成熟的策略之一，就是模拟体细胞高频突变，包括基于B细胞系(人、鸡等)高频突变的筛选策略以及基于其他细胞高频突变的策略研究。

2.基于抗体库的亲和力成熟策略:

基于抗体库的抗体亲和力成熟与基于抗体库的抗体筛选并无本质差别，均为体外高亲和力抗体筛选，区别在于，后者所用的库在构建或合成时无偏向性或只具有针对某抗原的有限的偏向性;而前者所用的库是基于确定的抗体序列模板所构建的。

建库策略

建库的策略可分为两个大的类别: – 类是构建较大的库，将抗体CDR区域甚至整个V区做随机突变;另一类是构建较小的库，将突变集中于抗体序列上特定的区域。相比大库的构建，小库构建更有序列针对性。突变区域的选择主要是基于抗原抗体复合物的结构信息或胚系基因热点(germlinehotspots)的预测。

服务项目：

二．抗体稳定性改进：

抗体在分子生物学实验中的应用，随着分子生物学发展的进步而越来越成熟，而抗体的稳定性，则是自然界长期进化的结果，在众多物种中，抗体分子形成了保守而稳定的结构，分子中70%氨基酸残基（免疫球蛋白结构域）以beta片层（beta-sheet）形式堆叠，形成紧密并能耐受蛋白酶作用的“三明治”结构，轻链和重链通过保守的二硫键形成具有三个结构域的免疫球蛋白，大大提高了分子本身的稳定性。

服务内容：

抗体分子的高Tm值—抗体纯度—抗体浓度

三．嵌合IgG抗体结构：

人-鼠嵌合抗体是利用重组技术将鼠源单抗的轻链、重链可变区插入含有人抗体恒定区的表达载体中，转化哺乳动物细胞进行表达所产生的单克隆抗体。人-鼠嵌合抗体的人源化程度可达到70%，完整的保留来了鼠源单抗的可变区，最大限度的保留了亲本活性，人抗体恒定区的引入则大大降低了免疫原性。

可见IgG抗体分子由2个重链和2个通过二硫键的轻链组成。

技术优势：保留亲本特性、易于操作。

服务项目：

易错PCR—嵌合F(ab′)2抗体

四．scFV/Fab构建

单链抗体(single-chian variable fragment, scFv)

是由抗体重链的可变区与轻链的可变区在一段肽链连接下构成的小分子，是具有抗体活性的最小结构功能结构单位;单链抗体可以由表达系统进行表达，也可以用噬菌体展示技术进行制备，由于其分子量小，穿透力强，半衰期短，免于抗原性低等等特点，所以在临床诊断与治疗，预防方面有重要作用和广阔的应用前景。

Fab片段(Fragment of antigen binding)